Ejemplo de Terapia Epigenómica en la enfermedad de Parkinson

Imagen obtenida de: https://metabolicas.sjdhospitalbarcelona.org/noticia/relacion-tienen-mecanismos-epigeneticos-adn

Tema:	Intervenciones farmacoepigenómicas como nuevos tratamientos potenciales para las enfermedades de Alzheimer y Parkinson
Mecanismo epigenómico tratado	Metilación del ADN
Método de Realización	Se empleó el principio activo del epigalocatequina-3-galato (EGCG), el cual es el principal polifenol del té verde. El ECGC activa la vía de señalización que involucra al receptor de acetilcolina nicotínico α7 (α7 nAChR) y restaura la expresión de Bcl2 , evitando la muerte celular en las neuronas tratadas con Aβ.
Resultados	-Se demostró que el EGCG evita que las proteínas mal plegadas se fibrilicen y restaura el potencial de membrana en las mitocondrias aisladas del hipocampo, la corteza y el cuerpo estriado. -A pesar de estos resultados, este fármaco se encuentra aún en ensayos clínicos en las fases II y III para evaluar los posibles efectos en la prevención de la agregación de Aβ a oligómeros tóxicos en la EP.

Referencia Bibliográfica:

1. Teijido O. Intervenciones farmacoepigenómicas como nuevos tratamientos potenciales para las enfermedades de Alzheimer y Parkinson [Internet]. MDPI. 2018 [cited 11 January 2020]. Available from: https://www.mdpi.com/1422-0067/19/10/3199/htm

Ejemplo de Técnica de Edición de Acidos Nucléicos en Enfermedad de Parkinson

Imagen tomada de : https://www.elindependiente.com/futuro/2017/02/04/crispr-cortar-pegar-genes-enfermedad/

Tema:	Utilización del sistema de edición de genes CRISPR-Cas9 para diseccionar mecanismos neuroinflamatorios y neurofarmacológicos en la enfermedad de Parkinson.
Tipo de Edición	In vivo-Células somáticas.
Dirigido hacia	*ADN bicatenario. *Genes: α-sinucleina, DJ-1,PINK1 , LRRK2 , Parkina.
Dirigido por	ARN+Proteína: CRISPR/Cas9 mediante la manipulación de marcadores del envejecimiento referentes al acortamiento de telómeros.
Órgano a tratar	Cerebro de primates no humanos para el desarrollo de neuronas dopaminérgicas.
Vía de administración	Co-inyección in vivo de mRNACas9 y sgRNA múltiples dirigida a tres loci: Parkina/DJ-1/ PINK1.
Resultados	Corto Plazo	Generar “reporteros”, detección de genes de susceptibilidad, construcción de modelos más estables sobre la enfermedad de Parkinson y disección de las vías de inflamación y degeneración neuronal.
	Mediano Plazo	-Reprogramación directa de fibroblastos a neuronas dopaminérgicas por medio de manipulación epigenética con CRISPR/Cas9. -Entendimiento de la fisiopatología y búsqueda de nuevas dianas terapéuticas
	Largo Plazo	Sigue siendo tema de discusión, sin embargo, se espera develar nuevos blancos terapéuticos relacionados con las características clave que se ven afectadas en los procesos neurodegenerativos relacionados con el envejecimiento.

Bibliografía:

1. Sandoval A. Nuevos modelos transgénicos para el estudio de la enfermedad de Parkinson basados en sistemas de edición con nucleasas [Internet]. Clinicalkey.es. 2017 [cited 4 January 2020]. Available from: https://www.clinicalkey.es/#!/content/playContent/1-s2.0-S0213485317303067?scrollTo=%23hl0000526

De Apoyo:

2. Luo J. Utilization of the CRISPR-Cas9 Gene Editing System to Dissect Neuroinflammatory and Neuropharmacological Mechanisms in Parkinson’s Disease [Internet]. Springerlink. 2019 [cited 4 January 2020]. Available from: https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs11481-019-09844-3

EJEMPLO DE TERAPIA CELULAR EN PARKINSON

Imagen obtenida de: http://www.fundacionmencia.org/wp-content/uploads/2015/11/terapia-celular-solucion-enfermedades-raras-fundacion-mencia-esp.jpg

Tipo de Stem Cell	Células de origen fetal, células cromafines de la médula suprarrenal, células troncales neuronales del cerebro adulto.
Método de Obtención	-El tejido fetal se obtuvo de abortos electivos y posteriormente se cultivaron. -El tejido suprarrenal se obtuvo de un donador cadavérico de 14 años, las células cromafines se cultivaron y estimularon con CM-EBF. -Las células troncales se cultivaron en el laboratorio por largos periodos y luego se diferencian en neuronas o glía cuando se requiera.
Vía de Administración	Se lo realizó mediante microcirugía abierta y cirugía estereotáxica en la cabeza del núcleo caudado de la paciente.
Resultados	Corto Plazo	Los primeros pacientes parkinsonianos que recibieron trasplante autólogo de médula suprarrenal tuvieron una respuesta muy pobre.
	Mediano Plazo	El trasplante se puso en contacto con el líquido cerebroespinal, lo que incrementó probablemente la sobrevida del implante e indujo una mejoría significativa de la rigidez y la acinesia.
	Largo Plazo	Se estima que en un futuro se podrá tratar de mejor forma estas enfermedades, sin embargo, aún se debe estudiar y comprender de forma integral la terapia celular porque aún existen resultados que no arrojan buenos resultados.

Bibliografía:
1. Arias O. Terapia Celular en la Enfermedad de Parkinson [Internet]. Revecuatneurol.com. 2015 [cited 27 December 2019]. Available from: http://revecuatneurol.com/wp-content/uploads/2015/06/Terapia.pdf

De Apoyo:
2. Prósper F. Trasplante celular y terapia regenerativa con células madre [Internet]. Scielo. 2016 [cited 27 December 2019]. Available from: http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1137-66272006000400018

Ejemplo de transgénico animal en la EP

El modelo más empleado hasta el día de hoy para transgénesis en la EP sigue siendo el ratón, por ser un homologo humano en un 99% del genoma. Las modificaciones que más comúnmente se realizan en el modelo murino están enfocadas en los genes LRRK2, PARK7, PARK2, PINK1.  Se ha realizado la sobreexpresión de mutaciones del gen de SNCA (A30P y A53T) en ratones y ratas, observándose defectos en la transmisión de dopamina y la presencia de depósitos de α-sinucleína alrededor del cerebro.(1)

Imagen tomada de: http://epmundo.com/2018/asi-son-los-avances-de-la-cura-del-mal-de-parkinson/

Tema	Modelo transgénico de la enfermedad de Parkinson en estudios preclínicos.
Tipo de Animal Transgénico	Ratón transgénico KO (Knock-out)
Método de Obtención	Inyección unilateral del virus en el estriado, causando la pérdida de neuronas dopaminérgicas y la presencia posterior de inclusiones de α-sinucleína
Usos	-Similar la enfermedad de Parkinson para su posterior estudio y tratamiento. -Desarrollo de fármacos que permitan el tratamiento efectivo de la EP.

Ventajas:

• ·         Búsqueda de mejores tratamientos, terapias y procedimientos diagnósticos para las enfermedades (EP).
• ·         Estudio de las resistencias que genere el animal frente a la enfermedad inoculada.
• ·         Analizar el comportamiento que muestra el animal frente a la enfermedad inoculada.
• ·         Facilitan un mayor entendimiento de los mecanismos de funcionamiento y control de los genes.
• ·         Determinar las diversas susceptibilidades que presenta el animal en cada etapa de la enfermedad.

Desventajas:

• ·         Esta práctica presenta costos muy elevados.
• ·         Al utilizar nuevas técnicas, puede poner en peligro al medio natural y ocasionar plagas.
• ·         Pocos modelos transgénicos sobreviven a los distintos procesos.
• ·         Puede existir expresión variable dentro de las distintas líneas germinales.
• ·         Resultados pueden ser erróneos y poco reales frente a las enfermedades que se busca tratar.

Bibliografía:

1. Cota A. Modelo transgénico de la enfermedad de Parkinson en estudios preclínicos. [Internet]. Ciatej. 2016 [cited 18 December 2019]. Available from: https://ciatej.mx/files/divulgacion/divulgacion_5cd0aa9319d46.pdf#page=84

De Apoyo:
2. López J. ¿Que nos enseñan los modelos animales y celulares sobre la enfermedad de Parkinson? [Internet]. Idus.us.es. 2015 [cited 18 December 2019]. Available from: https://idus.us.es/xmlui/bitstream/handle/11441/17790/%BFQue%20nos%20ense%F1an%20los%20modelos%20animales%20y%20celulares%20sobre%20la%20enfermedad%20de%20Parkinson.pdf?sequence=1

Ejemplo de ADN recombinante en Parkinson

ADN recombinante artificial en la Enfermedad de Parkinson

Imagen obtenida de: https://elmedicointeractivo.com/wp-content/uploads/2019/11/parkinson.jpg

T	LRRK2 regula la actividad autofágica y se localiza en microdominios de membrana específicos en un nuevo modelo celular de indicador genómico humano
O	Identificar las funciones que cumple la LRRK2 en la vía endosómica-autofágica para observar su incidencia en el aparecimiento de la enfermedad de Parkinson y con ello crear un tratamiento apropiado para los pacientes.
G	LRRK2
ER	Eco RI / Xho I
EL	pBlueSKM (Invitrogen); ADN ligasa T4
V	BAC-YPet- LRRK2 -WT; pH-FRT-Hy
CR	Células HEK293
MTG	Transfección
MIC	Cultivo, inmunotransferencia, inmunoprecipitación, inmunofluorescencia indirecta.

Conclusión: La investigación indica que la LRRK2 si tiene un papel clave en la incidencia de la enfermedad de Parkinson, sin embargo se necesitan aún más estudios para determinar el grado con el cual se manifiesta y posibles terapias que reduzcan su impacto(1).

Bibliografía:

1. Alegre J. LRRK2 regula la actividad autofágica y se localiza en microdominios de membrana específicos en un nuevo modelo celular de indicador genómico humano [Internet]. Academic. 2011 [cited 14 December 2019]. Available from: https://academic.oup.com/hmg/article/18/21/4022/2527063#85571625

Ejemplo de recombinación de ácidos nucleicos que suceden en la naturaleza

RECOMBINACIÓN DE ADN EN LA NATURALEZA

La recombinación genética es un proceso que lleva a la obtención de un nuevo genotipo a través del intercambio de material genético entre secuencias homólogas de DNA de dos orígenes diferentes. Como ejemplo, en la naturaleza se observa recombinación genética en bacterias, las cuales presentan 3 procesos: en la transformación, la bacteria acepta y recombina su genoma con ADN libre en el medio, en la transducción el ADN donador procede de un virus o en la conjugación, en este caso el ADN donador lo aporta un plásmido¹.


Bibliografía:
1. Mateos P. RECOMBINACIÓN GENÉTICA [Internet]. ResearchGate. 2010 [cited 5 December 2019]. Available from: https://www.researchgate.net/publication/261983351_RECOMBINACION_GENETICA

De apoyo:
2. Betancor L. Genetic [Internet]. Genética Bacteriana. 2016 [cited 5 December 2019]. Available from: http://130.206.160.21/rid=1NQMWD86S-1N93KN5-R6/GeneticaBacteriana.pdf

Un metaanálisis de datos públicos de microarrays identifica redes reguladoras biológicas en la enfermedad de Parkinson

De acuerdo a un estudio realizado se examinaron genes comunes expresados ​​diferencialmente (DEG) de varios conjuntos de datos de microarrays de sangre de pacientes con enfermedad de Parkinson (PD) y sustancia negra (SN) mediante un metaanálisis. Se seleccionaron los genes específicos de PD de DEG comunes usando GCBI. A continuación, utilizamos una serie de software de bioinformática para analizar los miRNA, lncRNA y SNP asociados con los genes comunes específicos de PD, y luego se identific{o la red mTF-miRNA-gene-gTF.(1)

Bibliografía:

1. Zhen C. Un metaanálisis de datos públicos de microarrays identifica redes reguladoras biológicas en la enfermedad de Parkinson. [Internet]. PubMed. 2019 [cited 30 November 2019]. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29653596